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輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒

簡(jiǎn)要描述:

輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養細胞中,NADP+和NADPH含量測定可以計算NADP(NADPH + NADP+ )含量和NADPH/NADP+比值,其變化與磷酸戊糖途徑和生物合成以及抗氧化反應密切相關(guān)。

更新時(shí)間:2024-04-09;廠(chǎng)商性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商;覽量:652

輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒

商品詳情:
測定意義

輔酶ⅡNADP(H)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養細胞中,NADP+和NADPH含量測定可以計算NADP(NADPH + NADP+ )含量和NADPH/NADP+比值,其變化與磷酸戊糖途徑和生物合成以及抗氧化反應密切相關(guān)。NADPH/NADP+比值不僅是細胞氧化還原態(tài)的主要標志之一,而且在PPP途徑、生物合成和抗氧化代謝中具有重要調控作用。

貨號

規格

檢測方法

YSH3292

100管/48樣

微量法

YSH3292-1

50管/24樣

可見(jiàn)分光光度法

測定原理

分別用酸性和堿性提取液提取樣品中NADP+和NADPH。NADPH通過(guò)PMS的遞氫作用,使氧化型噻唑藍(MTT)還原為甲瓚,570nm下檢測吸光值,從而測定NADPH含量。利用6-磷酸葡萄糖脫氫酶還原NADP+為NADPH,從而檢測NADP+含量。

所需的儀器和用品

可見(jiàn)分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
樣品中AA提?。?/span>

1.按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱(chēng)取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行室溫勻漿,然后轉移到1.5 mL EP 管中,蓋緊后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自來(lái)水冷卻后,8000g,,4℃離心10min,上清液置冰上待測。

2.細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細菌或細胞加入1mL試劑一),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

3.血清等液體:直接檢測。

計算公式如下:

1、血清(漿)LAP活力的計算:

單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘生成1 nmol的對硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA

2、組織、細菌或細胞中LAP活力的計算:

1)按樣本蛋白濃度計算:

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

2)按樣本鮮重計算:

單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W

3)按細菌或細胞密度計算:

單位的定義:每1萬(wàn)個(gè)細菌或細胞每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA

V反總:反應體系總體積,2×10-4 L;ε:對硝基苯胺摩爾消光系數,9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.05 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應時(shí)間,2 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;2000:細菌或細胞總數,2000萬(wàn)。

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輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒外切-β-1,4-葡聚糖酶/纖維二糖水解酶(C1)測試盒/分光光度法50管/24樣

外切β1,4葡聚糖酶/纖維二糖水解酶(C1)測試盒/微量法100管/48樣

微量丙二醛(MDA)測試盒/TBA法50管/24樣

微量游離血紅蛋白(FHb)測試盒/比色法50管/48樣

微球菌粉/測試盒30mg

維生suB1(VB1)熒光檢測試盒50T

維生suB1測試盒/分光光度法50管/48樣

維生suB1測試盒/微量法100T/96S

維生suB2(VB2)熒光檢測試盒50T
注意事項:

1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標準品均需臨用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天內使用完畢。

2. 為保證實(shí)驗結果的準確性,需先取1-2個(gè)樣做預實(shí)驗,如果測定的吸光值過(guò)高(高于2.5),用蒸餾水稀釋后再測定。

3. 與茚三酮反應在570nm處無(wú)吸收峰,因此,570nm處測定結果不含這兩種氨基酸的量。

4.檢出限為100μmol/L。


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